隨著用于醫(yī)學(xué)和研究目的的大-麻合法化程度的提高，對(duì)其活性成分進(jìn)行準(zhǔn)確，高通量分析的需求急劇增加。

最重要的兩個(gè)是具有治療用途的精神活性THC和止痛CBD。 THC和CBD的比例對(duì)于區(qū)分藥用大-麻和休閑大-麻至關(guān)重要。這個(gè)比例對(duì)稅務(wù)部門(mén)，醫(yī)療監(jiān)管者和種植者都非常重要。

THC / CBD比率的確定

準(zhǔn)確測(cè)定THC / CBD的比例至關(guān)重要，這是通過(guò)對(duì)大-麻葉，芽和花的樣品進(jìn)行有效的樣品制備來(lái)確定的。傳統(tǒng)的樣品制備方法已使用拍打或研磨機(jī)將這些材料均質(zhì)化。當(dāng)在聚丙烯微孔板中進(jìn)行操作時(shí)，這些機(jī)器施加的極-端壓力通常會(huì)損壞孔板，從而導(dǎo)致破裂，滲漏并最終導(dǎo)致交叉污染。分析的目的是確定總THC。

這包括無(wú)羧酸鹽形式（THCA）以及熱轉(zhuǎn)化形式THC。醫(yī)學(xué)價(jià)值是CBD含量的函數(shù)，CBD含量必須再次總計(jì)才能包括天然羧酸形式。

高效液相色譜（HPLC）可以在將THCA和CBD的酸成分轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的游離形式的THC和CBD之前鑒定它們的酸成分，因此首-選mouth劑和大-麻產(chǎn)品。

氣相色譜（GC）分析的一個(gè)缺點(diǎn)是熱注射器中THCA和TBDA的破壞，這可能會(huì)使THC / TBD比的最終數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。因此，HPLC / UV或LC / MS應(yīng)該是首-選的分析方法。以下方法也可用于制劑和植物原料。

儀器與方法

• Porvair Sciences 2ml深孔種子基因組微孔板219030

• Porvair Sciences 96孔蓋墊219004

• Porvair Sciences Microlute真空歧管228008

• Porvair Sciences Microlute P3板240100

• 具有96孔螺旋針頭的Porvair Sciences Minivap蒸發(fā)器（229206＆229072）

• 具有3板適配器的Porvair Sciences Microshake微板振蕩器（229651和229654）

• Porvair Sciences 2.2毫升方形深孔板（219009）

• 實(shí)驗(yàn)室研磨機(jī)（例如Spex GenoGrinder）

對(duì)于THC / CBD比率分析，應(yīng)隨機(jī)取樣大-麻葉，芽和花的樣品（如果有）。我們建議在Porvair 229030植物基因組板的每個(gè)孔中準(zhǔn)確稱(chēng)量約50mg的干燥植物材料。

 將3 x 3mm的鋼或鎳研磨球（如果研磨種子材料，則需要鎳）添加到植物基因組板中。

用219004蓋墊密封板，然后將蓋好的板放入GenoGrinder中。

在1500 rpm下研磨2分鐘。取下蓋墊，將干燥的地面粉末（應(yīng)通過(guò)1毫米篩子）轉(zhuǎn)移到Porvair P3過(guò)濾微孔板（240100）的每個(gè)孔中。

準(zhǔn)確添加400ul甲醇或異丙醇（根據(jù)需要）以溶解植物材料中的油性殘留物。

在Porvair Microshake搖床（229651）上用P3板適配器（229654）或其他合適的搖床以330 rpm的速度攪拌10分鐘。

P3板中的超疏水玻璃料將防止泄漏，但為使您更加省心，可以使用可選的排水蓋墊，如果需要，應(yīng)在測(cè)定開(kāi)始之前將其置于板的底面（219005）。

搖晃后，取下排液蓋，將P3板放置在Porvair Microlute歧管（228008）上，該歧管在氣室中具有2ml的收集板。該收集板可以是另一個(gè)種子基因組板（219030）或標(biāo)準(zhǔn)的2ml方孔板（219009）。任何SLAS / ANSI格式的深孔板均可用于收集步驟，但是219009和219030使用的是無(wú)萃取聚丙烯，不會(huì)對(duì)要分析的溶液產(chǎn)生滲濾液。

此外，其板的幾何形狀已針對(duì)Porvair Microlute歧管進(jìn)行了優(yōu)化，因此無(wú)需進(jìn)一步調(diào)整即可防止孔之間的交叉污染。抽真空以將純化的提取液向下抽吸通過(guò)過(guò)濾器并進(jìn)入收集板的孔中。使用歧管上的閥隔離真空源，并使用針形閥釋放增壓室中的真空。現(xiàn)在可以丟棄濾板，可以將含有有機(jī)提取物的收集板帶入HPLC進(jìn)行分析。

如果首-選分析總THC和CBD，則需要執(zhí)行額外的步驟。在這種情況下，必須通過(guò)加熱將THCA和CBDA轉(zhuǎn)化為THC和CBD。

取2ml含有溶劑提取物的收集板，將其放在Porvair Minivap上。將溫度設(shè)置為最-高（60℃）并蒸發(fā)至干，繼續(xù)用熱氣加熱45分鐘，以使熱不穩(wěn)定的THCA和CBDA解離為THC和CBD。冷卻至室溫后，將其重新懸浮在400ul的溶劑中，在微搖瓶上搖晃硅藻土以確保充分混合，然后進(jìn)行HPLC分析。